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实验6-抗病毒感染-
2023-04-10
甘草多糖免疫学实验研究解读（六）
甘草多糖抗病毒感染实验
于长水
甘草多糖提纯后，成为非特异免疫原性新物质。在研发过程中，在投入市场应用前，在动物中实验观察了甘草多糖抗病毒作用。
实验由天津医科大学微生物教研室进行。
实验材料与方法：
由于病毒只能在活的细胞内生长，选用小鼠传代纤维母细胞培养病毒。
病毒则以呼吸道病毒——腺病毒，肠道病毒——柯萨奇病毒做实验。
每种病毒分四个组，甘草多糖分为1:4、1:8、1:16、1:32四个稀释度，稀释度越高，含甘草多糖量越低。
- 甘草多糖对细胞毒性测定
病毒在组织细胞生长对照
甘草多糖是否对细胞具有毒性，细胞是否适于病毒生长，都应该先做预试验，以保证正式实验结果的可靠性。
在细胞液中加入不同稀释度甘草多糖，培养48小时后观察，结果细胞形态正常均无变化。
病毒在细胞液中生长良好，均出现细胞病变。
结果解读：
表一、甘草多糖对细胞的毒性作用测定、病毒在细胞中生长对照
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实验组 细胞对照 病毒对照 |
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1:4 —— —— ++++ 1:8 —— —— ++++ 1:16 —— —— ++++ 1:32 —— —— ++++ |
从表一可明显看出，甘草多糖不同稀释度溶液对细胞均无毒性。对照病毒生长良好，细胞适宜病毒生长。
据此，可进行正式实验。
- 分组实验
1组：在细胞中，先加入不同稀释度甘草多糖液，24小时后吸出甘草多糖液，加入病毒液。
2组：在细胞中，先加入病毒液，1小时后，洗去病毒液，加入不同稀释度甘草多糖液。
3组：不同稀释度甘草多糖液与病毒液同时加入细胞液中。
4组：不同稀释度甘草多糖液与病毒液混合，放置37℃培养2小时后，再加入细胞液中。
相同的分组与相同的方法，分别对腺病毒、柯萨奇病毒做了实验观察。
表二、甘草多糖对腺病毒感染保护率（%）
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1:4 1:8 1:16 1:32 病毒对照 甘草多糖对照 细胞对照 |
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1 67.5 64.9 70.3 74.5 ++++ —— —— 2 14 5.3 6.0 10.0 ++++ —— —— 3 60 49.4 48.9 42.5 ++++ —— —— 4 45.3 43.5 49.6 47.4 ++++ —— —— |
表三、甘草多糖对柯萨奇病毒感染保护率（%）
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1:4 1:8 1:16 1:32 病毒对照 甘草多糖对照 细胞对照 |
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1 55.5 64.5 57.6 59.0 ++++ —— —— 2 50.0 43.4 45.2 39.1 ++++ —— —— 3 42.5 39.3 35.4 43.9 ++++ —— —— 4 47.7 40.9 47.7 42.6 ++++ —— —— |
从表二、表三可看出，甘草多糖对腺病毒、柯萨奇病毒均有阻止病毒进入细胞造成感染的功能作用。
还观察到，甘草多糖对这两种病毒均有直接的灭活作用（即杀灭病毒）。
呼吸道病毒和肠道病毒，都是经常感染人的致病病毒，而且对于病毒目前还缺乏理想的高效治疗药物。
腺病毒是一群多型的病毒，主要经上呼吸道侵入人体，也可经眼结膜侵入，引起的疾病包括：急性上呼吸道感染、急性喉炎、咽结膜热、流行性角膜结膜炎、非典型肺炎等症。侵犯儿童和中老年人。
柯萨奇病毒是一群多型的病毒，主要通过肠道感染，可引起无菌性脑膜炎、流行性胸痛、夏季感冒、咽峡炎、心肌炎、麻痹症等。这群病毒对外环境的抵抗力较强。
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2023-02-23
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