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实验8-抗肿瘤-
2023-04-10
甘草多糖免疫学实验研究解读（八）
甘草多糖抗肿瘤实验
于长水
在甘草多糖提纯后，成为非特异免疫原性新物质。在研发过程中，在投入市场应用前，在动物中实验观察了甘草多糖抗肿瘤（癌）的作用，包括甘草多糖抑瘤作用、甘草多糖对荷瘤生存时间的影响。
甘草多糖抑瘤作用实验
实验由天津肿瘤医院研究所流行病室进行。
实验材料与方法：
实验选用昆明种纯系小鼠，随机分为四个组，每组十只。实验组三个组，分别为按50毫克、100毫克、200毫克不同剂量甘草多糖组，设一对照组。
肿瘤细胞取自已经生长腹水瘤的小鼠，取腹水在显微镜下计瘤细胞数，各组按瘤细胞0.1毫升注射在小鼠腹股沟皮下。在注射瘤细胞24小时后，开始按不同剂量注射甘草多糖液于腹腔，对照组注射腹腔同容量生理盐水。
连续注射7天，最末一次后继续饲养1周。然后解剖小鼠，取肿瘤组织称重，并测量体积，还做病理检查。
实验研究结果与解读：
一、肿瘤组织重量
对照组肿瘤重量平均为1.40克。
甘草多糖50毫克组肿瘤重量平均为0.66克。
甘草多糖100毫克组肿瘤重量平均为0.43克。
甘草多糖200毫克组肿瘤重量平均为0.61克。
从肿瘤平均重量看，甘草多糖各组平均为0.43克~0.66克，显著低于对照组肿瘤平均重量的1.40克，比对照组重量减轻了约40%~60%。显示了甘草多糖抑制肿瘤生长的作用。
二、肿瘤体积测量
对照组中肿瘤体积最大的为1.8×2×2（cm3）
甘草多糖50毫克组中肿瘤体积组大的为1.3×0.6×0.5（cm3）
甘草多糖100毫克组中肿瘤体积组大的为1.4×0.8×0.3（cm3）
甘草多糖200毫克组中肿瘤体积组大的为1.3×0.7×0.5（cm3）
从各组肿瘤中体积最大的看，甘草多糖各组肿瘤中体积最大的为0.34~0.46 cm3，显著比对照组7.2 cm3体积缩小了90%以上。打个比方说，对照组中肿瘤体积最大的像个栗子，而甘草多糖各组中肿瘤体积最大的只有一个花生仁大小。显示了甘草多糖抑制肿瘤生长的作用。
三、肿瘤病理检查
对照组与甘草多糖各组小鼠淋巴结均未见转移的癌细胞。
如此设想，上述抑瘤实验研究，是在给小鼠注射肿瘤细胞后24小时才给予甘草多糖的实验结果；如果，先给予了甘草多糖后再注射肿瘤细胞，可能发挥更为显著的抑瘤作用。
甘草多糖对荷瘤小鼠生存时间的影响
实验由天津市肿瘤研究所流行病室进行。
实验材料与方法：
实验取小鼠50只，随机分成5个组，同样饲养。选用处于对数生长期的艾氏腹水瘤，计数制成注射液，每只小鼠腹腔注射0.1毫升。
甘草多糖分两种给药方法：
1~3组为后给药组，在小鼠后腿腹股沟皮下注射、腹腔接种艾氏腹水瘤4小时后，1、2组开始每日分2~3个点皮下注射甘草多糖液1周，3组为对照组，注射等量生理盐水。
4、5组为先给药组，与后给药组方法相同，4组为实验组给甘草多糖液1周，再腹腔接种艾氏腹水瘤液。5组为对照组注射生理盐水1周，再腹腔接种艾氏腹水瘤液。
荷瘤（即带瘤）小鼠生命延长时间，实验组从停止给药后、对照组从停止给水第一天起计算。
结果与解读：
一、
1~3组后给药组四周内小鼠存活天数
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组别 小鼠只数 平均存活天数 生命延长率% |
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对照组（3组） 10 12.8 ——
1组实验组
2组实验组 |
4、5组先给药组四周内小鼠存活天数
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组别 小鼠只数 平均存活天数 生命延长率% |
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对照组（5组） 10 17.8 ——
4组实验组 |
二、在实验中观察到，后给药的对照组（生理盐水组）小鼠在停止给药的第7天开始出现死亡，半数以上在第10天前死亡，第16天时已有80%死亡，第27天时全部死亡。
后给药的实验组小鼠在停药后第12天开始出现死亡，至第20天约半数死亡，至第8周时甘草多糖高剂量组仍有半数小鼠存活，低剂量组也有40%存活。
先给药的荷瘤小鼠存活时间，从接种艾氏腹水瘤后的第1天开始计算。对照组从接种瘤后第12天开始出现小鼠死亡，半数以上在3周内死亡，24天时小鼠已全部死亡。
实验组小鼠从第14天开始出现死亡，第4周时有半数以上小鼠死亡，观察至第8周时仍有20%存活。
三、甘草多糖抗肿瘤实验研究，展现诸多启示：
1、甘草多糖具有抑制小鼠肿瘤重量与体积的显著作用，证明抑制了肿瘤细胞的异常增殖；
2、甘草多糖对于荷瘤小鼠具有延长存活天数与生命延长率提高的作用，证明可使小鼠荷瘤生命延长率达64.8%~73.4%。
3、甘草多糖作为一种高效免疫调节剂，将有效联合用于肿瘤防治。
4、先给药组的小鼠实验结果，含有提早防治肿瘤的意义。
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2023-02-23
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